摘要:目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录体1(NEAT1)NEAT1对喉鳞状细胞癌(LSCC)细胞迁移和侵袭的影响，并进一步分析miR-429/锌指E-盒结合同源异形盒1(ZEB1)轴在其中发挥的作用。方法 慢病毒转染建立稳定敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞，通过RT-qPCR检测细胞lncRNA NEAT1表达以验证转染效率，通过Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，通过Western blot检测细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达。通过生物信息学分析miR-429与lncRNA NEAT1和ZEB1 mRNA间的潜在结合位点，并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-429与lncRNA NEAT1以及miR-429与ZEB1 mRNA结合。将miR-429抑制剂转染敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞，通过Western blot检测细胞ZEB1表达。进一步检查敲减ZEB1对抑制miR-429的敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞迁移、侵袭和EMT的影响。结果 敲减lncRNA NEAT1降低LSCC细胞lncRNA NEAT1表达，抑制细胞迁移和侵袭并下调细胞N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达。miR-429与lncRNA NEAT1和ZEB1 mRNA间存在潜在结合位点，且miR-429与lncRNA NEAT1以及miR-429与ZEB1 mRNA结合。抑制miR-429逆转了敲减lncRNA NEAT1对LSCC细胞ZEB1表达的抑制作用。此外，敲减ZEB1逆转了抑制miR-429对敲减lncRNA NEAT1的LSCC细胞迁移和侵袭的促进作用及EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin、Slug和Snail表达的上调作用。结论 lncRNA NEAT1促进LSCC细胞迁移和侵袭，其机制可能与海绵化miR-429上调ZEB1表达促进LSCC细胞EMT有关。

摘要:目的 探讨角蛋白4(KRT4)过表达对喉癌细胞活力、增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。方法 构建KRT4过表达质粒，转染TU177喉癌细胞。实验共分 3 组:CON组(空白对照组，未转染)，Oe-NC组(阴性对照组，转染对照质粒空载体)，Oe-KRT4组(目的基因实验组，转染KRT4过表达质粒)。通过RT-qPCR法及Western blot法验证转染效率，通过CCK-8法、平板克隆实验、细胞划痕实验、Transwell小室侵袭实验和流式细胞术检测KRT4过表达对喉癌细胞活力、增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。结果 RT-qPCR法及Western blot法结果提示Oe-KRT4组KRT4 mRNA和KRT4蛋白表达水平较CON组与Oe-NC组显著升高，差异具有统计学意义(P＜0.000 1)。CCK-8法结果提示Oe-KRT4组细胞活力较CON组与Oe-NC组显著减弱，差异具有统计学意义(P＜0.000 1)。平板克隆实验结果提示Oe-KRT4组克隆数显著低于CON组与Oe-NC组，差异具有统计学意义(P＜0.000 1)。细胞划痕实验结果提示Oe-KRT4组迁移率显著低于CON组与Oe-NC组，差异具有统计学意义(P＜0.000 1)。Transwell小室侵袭实验结果提示Oe-KRT4组细胞穿膜数显著低于CON组与Oe-NC组，差异具有统计学意义(P＜0.000 1)。流式细胞术结果提示Oe-KRT4组细胞凋亡率较CON组与Oe-NC组显著增加，差异具有统计学意义(P＜0.000 1)。结论 KRT4过表达能显著抑制喉癌细胞的活力、增殖、迁移和侵袭，并促进喉癌细胞的凋亡，因此KRT4有望成为喉癌治疗的潜在生物标志物。

摘要:近年来，达芬奇机器人外科技术和腔镜肿瘤外科技术不断发展，抗肿瘤药物研究不断取得新的突破，多学科诊疗模式(MDT)肿瘤治疗理念不断加强。这些日新月异的进展使得头颈肿瘤外科这门古老的学科在外科技术和治疗理念上都呈现出了强劲发展趋势，把头颈肿瘤的诊治朝着更加微创、美容、精准和规范的方向推进了一大步，具有广阔的应用前景。

摘要:目的 探究SHC SH2结构域结合蛋白1(SHCBP1)在鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系中的表达情况，分析其对鼻咽癌细胞系的增殖、侵袭能力及上皮间质转化(EMT)过程的影响。方法 利用TCGA数据库分析SHCBP1在头颈鳞状细胞癌(HNSC)中的表达情况，分析SHCBP1表达程度与肿瘤免疫细胞浸润程度的关系。同时收集2019年9月—2021年9月于贵州医科大学附属医院及贵州医科大学附属肿瘤医院经病理确诊的31例鼻咽癌初诊患者临床组织样本，所有患者就诊前均未接受任何放化疗，并收集同期就诊的31例疑似鼻咽癌但病检示慢性鼻咽炎组织作为对照组。利用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测临床样本及鼻咽癌细胞系5-8F中SHCBP1的表达情况。细胞实验以鼻咽癌细胞系5-8F、正常鼻咽部永生化上皮细胞系NP69作为研究对象。采用利用慢病毒载体shRNA-SHCBP1干扰技术沉默5-8F细胞中SHCBP1表达，并分为NC组(空载慢病毒LV-Zs-Green-PURO-NC感染5-8F)、SHCBP1-shRNA组(LV-SHCBP1-shRNA-Zs-Green-PURO沉默5-8F细胞SHCBP1表达)。CCK-8法、克隆形成实验检测SHCBP1对鼻咽癌细胞增殖的影响；划痕实验、Transwell迁移、侵袭实验检测SHCBP1对鼻咽癌细胞的转移、侵袭能力的影响。Western blot检测NC组、SHCBP1-shRNA组中E-cadherin、N-cadherin、基质金属蛋白9(MMP9)、Vimentin的表达情况。结果 在HNSC中SHCBP1高表达，表达量与Th2细胞浸润程度相关。与慢性鼻咽炎组织相比，鼻咽癌组织中SHCBP1明显高表达，差异具有统计学意义(P<0.05)。与NC组相比，SHCBP1-shRNA组鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭能力均减弱，差异具有统计学意义(P<0.05)。SHCBP1-shRNA组E-cadherin表达较NC组升高，N-cadherin、MMP9、Vimentin表达较NC组降低，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SHCBP1在鼻咽癌中高表达，并可促进鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移及激活EMT过程。

摘要:目的 探讨下调内质网相关降解蛋白(Derlin-1)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株化疗敏感性的作用及机制。方法 收集10例鼻咽癌患者鼻咽癌组织及癌旁正常组织并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测组织中Derlin-1 mRNA含量；本实验分组：空白对照组(control组)、阴性对照组(NC组)、敲低组(si-Derlin-1组)。RT-qPCR法检测鼻咽癌Derlin-1 mRNA的表达；采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同顺铂浓度时3组细胞的增殖；Annexin V-FITC/PI双染法检测顺铂浓度为5 μmol/L时3组细胞的凋亡率；Transwell检测顺铂浓度为5 μmol/L时3组细胞的侵袭迁移能力；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法、Western blot法检测Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9 mRNA及蛋白相对表达量。结果 RT-qPCR结果显示，鼻咽癌癌组织中Derlin-1 mRNA相对表达量较癌旁正常组织显著减少，差异具有统计学意义(P<0.05)；si-Derlin-1组Derlin-1 mRNA较control组、NC组明显下降，差异具有统计学意义(P<0.05)MTT法结果显示，与control组、NC组相比，si-Derlin-1组细胞增殖率明显降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；Annexin V-FITC(绿色荧光)/PI(红色荧光)双染法结果可见，当DDP浓度为5 μmol/L时，si-Derlin-1组细胞凋亡率为(29.65±2.35)%，较control组(13.24±1.43)%、NC组(15.09±1.32)%明显升高，差异具有统计学意义(P<0.05)；Transwell实验结果显示，当DDP浓度为5 μmol/L时，si-Derlin-1组细胞迁移率、侵袭率分别为(20.15±2.20)%、(22.33±3.5)%，较对照组(100±1.3)%、(99±2.43)%以及NC组(96.72±3.22)%、(94.44±1.21)%明显降低，差异具有统计学意义(F迁移率=1080.610，P=0.000)、(F侵袭率=848.590，P=0.000)；RT-qPCR结果显示，相比control组、NC组，si-Derlin-1组凋亡抑制因子Bcl-2 mRNA的表达量下降，凋亡诱导因子Bax mRNA表达量上调；si-Derlin-1组迁移相关因子MMP2与MMP9 mRNA相对表达量明显下降，差异均具有统计学意义(P均<0.05)；Western blot结果显示，相比control组、NC组，si-Derlin-1组凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达量下降，凋亡诱导蛋白Bax表达量上调；si-Derlin-1组迁移相关蛋白MMP2与MMP9蛋白相对表达量明显下降，差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论 Derlin-1在鼻咽癌中表达上调，下调Derlin-1可提高鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性，机制可能与促进细胞凋亡、抑制迁移有关。

摘要:目的探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及胃蛋白酶(Pepsin)对喉鳞状细胞癌局部侵袭的作用。方法收集2020年10月—2022年3月柳州市人民医院耳鼻咽喉科住院手术并经病理确诊的32例喉鳞状细胞癌患者的癌组织及其癌旁组织新鲜标本，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测MMP-2、MMP-9及Pepsin mRNA在上述组织标本中的表达情况，结合临床资料分析。结果喉癌组织中MMP-2、MMP-9及Pepsin mRNA表达高于癌旁组织，差异具有统计学意义(P＜0.05)；Ⅲ、Ⅳ期组表达水平高于Ⅰ、Ⅱ期组(P＜0.05)，淋巴结转移组高于无转移组(P＜0.05)；MMP-2、MMP-9 mRNA在中-低分化鳞状细胞癌组的表达高于高分化组(P＜0.05)；Pepsin mRNA在60岁及以上喉癌组中表达高于60岁以下组(P＜0.05)。结论MMP-2、MMP-9和Pepsin在喉鳞状细胞癌的局部侵袭过程中发挥协同促进作用，预防和治疗咽喉反流是防止喉癌局部侵袭的重要环节。

摘要:目的 前期研究显示T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiam1）与喉癌临床预后密切相关。为了进一步明确Tiam1对喉癌生物学行为的影响，通过上调Tiam1在喉癌细胞中的表达，观察Tiam1上调后对喉癌细胞体内外增殖和侵袭转移能力的影响。方法 通过质粒转染构建Tiam1稳定过表达的喉癌Hep-2细胞（Hep-2/Tiam1）；本实验以pcDNA3（Mock）质粒作为转染对照。实验共分3组：空白对照组（Hep-2），转染pcDNA3（Mock）的Hep-2细胞株（Hep-2/Mock）和稳定转染Tiam1基因的Hep-2细胞株（Hep-2/Tiam1）。通过MTT、划痕实验及Transwell侵袭实验观察Tiam1过表达后对Hep-2细胞体外增殖、迁移及侵袭能力的影响。通过构建喉癌裸鼠移植瘤动物模型，进一步在体内水平观察Tiam1对喉癌的增殖及侵袭转移能力的影响。结果 MTT实验显示Hep-2/Tiam1与对照组Hep-2及转染空载体的Hep-2比较，各组之间细胞的增殖能力无明显差异（P>0.05）。划痕实验显示Hep-2/Tiam1细胞的迁移距离明显多于另两组（P<0.05）。Transwell侵袭实验发现穿过聚碳酸酯膜的Hep-2/Tiam1较其他两组明显增多（P<0.05）。Hep-2细胞的裸鼠移植瘤动物模型的成瘤率达100%。实验组Hep-2/Tiam1移植瘤的体积及重量与其他两组相比均无明显差异（P>0.05），但颈淋巴结转移率显著增加（P<0.05）。结论 Tiam1过表达后对喉癌Hep-2细胞体内外的增殖能力无明显影响，但能增强Hep-2细胞体内外的侵袭转移能力，提示其在喉癌的进展中发挥了重要作用。

摘要:目的 探讨葡萄糖调节蛋白78（GRP78）对鼻咽癌细胞CNE1的增殖与侵袭的作用机制。方法 收集2018年6月—2019年6月手术切除病灶的56例经病理确诊鼻咽癌患者的肿瘤组织作为鼻咽癌组织的研究对象，男40例，女16例；均为初次确诊鼻咽癌，并且尚未经过放/化疗干预。另同期选取进行治疗的50例慢性鼻咽炎组织作为比对，男38例，女12例。用免疫组化分别检测鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎组织中GRP78的表达。CNE1细胞实验分为对照组（CNE1鼻咽癌细胞常规培养，不进行外界干预）、NC组（CNE1鼻咽癌细胞转染LvGFP-Puro-GRP78-NC后，常规培养）、Sh-GRP78组（CNE1鼻咽癌细胞转染LvGFP-Puro-GRP78后，常规培养），转染完成48 h后，可在荧光显微镜下观察到各组细胞内的绿色荧光蛋白（GFP），PCR检测各组细胞中GRP78的mRNA的表达。Brdu标记检测各组细胞的增殖能力，Transwell小室检测各组细胞的侵袭能力，小管形成实验检测各组细胞的血管形成能力；双荧光素酶实验分析GRP78和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9的作用，Western blot检测各组细胞GRP78、MMP-2和MMP-9表达水平。结果 与慢性鼻咽炎组织相比，GRP78在鼻咽癌组织中的表达明显升高，Sh-GRP78组CNE1细胞增殖、侵袭和迁移能力、血管形成能力明显增强，差异均具有统计意义（P<0.05）。双荧光素酶实验结果显示MMP-2和MMP-9是GRP78作用的靶基因。与对照组相比，Sh-GRP78组细胞中GRP78、MMP-2和MMP-9的表达水平明显上升，差异均具有统计意义（P<0.05）。结论 GRP78在鼻咽癌组织中存在高表达的现象，并且GRP78靶向调控MMP-2和MMP-9的表达增强CNE1细胞的增殖、侵袭与血管新生的能力。

摘要:目的总结甲状腺癌侵犯颈段气管的气管缺损修复经验，提高术中气管缺损修复的治疗效果。方法收集2011年8月—2019年2月诊治的32例甲状腺癌侵犯颈段气管患者资料，其中6例术中采用锐性削除受侵气管外壁，8例气管袖式切除+端端吻合，6例胸锁乳突肌锁骨骨膜瓣，8例胸锁乳突肌锁骨骨膜瓣联合生物膜，2例前臂皮瓣+自体软骨移植，2例气管造瘘+Ⅱ期修复。结果6例锐性削除气管外壁患者中，有1例患者术后第6天出现气管瘘，予以换药后出院；余26例患者中，24例于术后6个月内恢复正常呼吸功能，1例前臂皮瓣+自体软骨移植患者术后出现局部气管狭窄，黏痰堵塞，带管生存，1例带蒂胸锁乳突肌骨膜瓣+生物膜患者术后气管局部塌陷伴双侧声带麻痹，带管生存。结论对于侵犯气管的甲状腺癌患者，根据不同的侵犯范围，选取合适的气管切除和缺损气管的修复方式，才能取得较高的手术成功率和较好的治疗效果。

摘要:目的通过观察microRNA107（miR107）在喉癌及癌旁组织中的表达，并且在喉癌细胞系选择性上调及敲减miR107，检测其对喉癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法收集40例喉癌及其邻近癌旁组织标本，运用RTqPCR检测miR107的表达，并分析其在喉癌中的临床意义。在人喉癌细胞TU212及TU686中过表达或敲减miR107，通过Transwell法检测其对喉癌细胞迁移及侵袭能力的影响。结果MiR107在喉癌组织中的表达显著低于癌旁组织，差异具有统计学意义（P<0.05），miR107的表达水平与肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移及原发部位相关（P<0.05）。细胞实验显示，过表达miR107后喉癌细胞迁移及侵袭能力明显下降（P<0.05），而敲减miR107后细胞迁移及侵袭能力明显增强（P<0.05）。结论MiR107在喉癌中表达显著下调，它能够抑制喉癌细胞的迁移和侵袭能力。