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    • IL-6/JAK2/STAT3对口腔鳞状细胞癌生物学行为的影响

      2022, 28(1):89-97.DOI: 10.11798/j.issn.1007-1520.202221483

      关键词:口腔鳞状细胞癌白细胞介素6蛋白酪氨酸激酶2信号传导和转录激活因子3细胞增殖
      摘要 (492)HTML (526)PDF 2.35 M (773)收藏

      摘要:目的 观察白细胞介素6抗体(IL-6)/蛋白酪氨酸激酶2抗体(JAK2)/信号传导和转录激活因子3抗体(STAT3)对口腔鳞状细胞癌(简称口腔鳞癌)细胞生物学行为的影响。方法 对口腔鳞癌细胞系进行慢病毒转染敲低IL-6基因,设立两组对照,一组为未干预组,另一组为空白载体组。通过CCK8实验和克隆形成实验检测IL-6对口腔鳞癌细胞增殖情况的影响,通过流式细胞术检测细胞周期变化,通过Transwell实验检测IL-6对口腔鳞癌细胞侵袭和迁移能力的影响。利用实时荧光定量PCR以及Western blot方法检测口腔鳞癌细胞中IL-6基因表达下调后其下游通路基因p-STAT3、p-JAK2与肿瘤血管新生有关的蛋白VEGFA、细胞周期调控蛋白Cyclin B1、细胞基质沉积相关蛋白MMP2、细胞凋亡抑制蛋白Survivin、上皮向间质转化相关蛋白Snail和E-Cadherin的表达情况。结果 敲低IL-6的口腔鳞癌细胞与对照组细胞比较,增殖率受到明显抑制,差异具有统计学意义(F=13.06,P=0.006);敲低IL-6的口腔鳞癌细胞中G1期细胞百分比下降,G2期细胞百分比上升,差异具有统计学意义(F=5.53,P<0.05);敲低IL-6的口腔鳞癌细胞与对照细胞比较,侵袭能力和迁移能力明显下降,差异具有统计学意义(F=23.59/53.11,P<0.01);口腔鳞癌细胞IL-6表达下调后,JAK2、STAT3、VEGFA、Cyclin B1、MMP2、Snail表达随之明显下降,而E-Cadherin表达显著增加,差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论 IL-6基因敲低后可明显抑制口腔鳞癌细胞的生长与增殖能力,可能诱导细胞G2期阻滞;抑制STAT3、JAK2、VEGFA、Cyclin B1、MMP2、Snail和Survivin表达,促进E-Cadherin蛋白表达。

    • 沉默变异性浆细胞瘤异位1抑制鼻咽癌细胞增殖作用的机制研究

      2020, 26(5):485-490.DOI: 10.11798/j.issn.1007-1520.202005003

      关键词:鼻咽癌|变异性浆细胞瘤异位1|Smad4|细胞增殖|细胞周期
      摘要 (33)HTML (0)PDF 1.05 K (113)收藏

      摘要:目的探讨变异性浆细胞瘤异位1(plasmacytomavarianttranslocation1,PVT1)抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制。方法构建特异性的shRNA PVT1慢病毒载体,包装慢病毒(LV/shRNA PVT1)并转导鼻咽癌C6661细胞,检测Smad4的表达;LV/shRNA PVT1转导C6661细胞24 h后转染Smad4 siRNA,通过细胞计数、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及流式细胞术分析沉默Smad4对LV/shRNA PVT1介导的鼻咽癌细胞生长及细胞周期的影响,并检测细胞周期相关调控因子的表达。结果下调PVT1后鼻咽癌细胞中Smad4的表达升高,而用siRNA沉默Smad4表达后,结果显示,抑制Smad4表达可阻断LV/shRNA PVT1介导的细胞生长抑制效应,同时细胞周期结果显示,与对照组相比,shRNA PVT1/Smad4 siRNA组细胞G1期比例降低,S期和G2期比例升高,并且CDK4、CDK6及cmyc的mRNA水平升高。结论下调PVT1可抑制鼻咽癌细胞增殖,并升高Smad4的表达,沉默Smad4可阻断shRNA PVT1对鼻咽癌细胞增殖的抑制效应;提示Smad4可能是PVT1作用的一个下游靶基因,下调PVT1可能通过Smad4抑制鼻咽癌细胞增殖。

    • 靶向血小板衍生生长因子-B siRNA对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

      2012, 18(3):170-174.

      关键词:血小板衍生生长因子|小干扰RNA|喉癌细胞株Hep-2细胞|细胞增殖
      摘要 (1100)HTML (0)PDF 405.00 Byte (1770)收藏

      摘要:目的 探讨血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor, PDGF)B链mRNA的siRNA质粒转染喉癌细胞株Hep2细胞,沉默Hep2细胞中PDGFB mRNA并检测细胞增殖。方法 以脂质体lip2000为载体,设计4组针对PDGFB的siRNA片段瞬时转染喉癌Hep2细胞,实时荧光定量PCR、Westernblot分别检测各组PDGFB mRNA、PDGFB蛋白的表达及干扰效果,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率,并与阴性对照组和空脂质体组进行比较。结果 实时荧光定量PCR检测显示:SiRNA2、SiRNA3、SiRNA4组PDGFB mRNA表达均有明显抑制,其中SiRNA2抑制率最高;与SiRNA1、阴性对照组及空脂质体组进行比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。Westernblot检测显示:SiRNA1、SiRNA2、SiRNA3组PDGFB mRNA蛋白表达均有下降,其中SiRNA2下降最明显,而SiRNA4、阴性对照组及空脂质体组对PDGFB蛋白表达无明显抑制作用。MTT法检测显示:SiRNA1、SiRNA2、SiRNA3均明显抑制Hep2细胞增殖,其中SiRNA2对Hep2细胞的抑制作用最明显;且与SiRNA4、阴性对照组及空脂质体组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。〖HTH〗结论 〖HTSS〗成功运用siRNA干扰喉癌Hep2细胞PDGFB mRNA,靶向沉默PDGF-B mRNA能有效抑制细胞增殖。

    • 莪术醇对人鼻咽癌细胞CNE2增殖、凋亡及周期的影响

      2011, 17(3):171-174.

      关键词:

      莪术醇|鼻咽癌|凋亡|细胞增殖

      摘要 (1924)HTML (0)PDF 333.00 Byte (1855)收藏

      摘要:目的 探讨莪术醇(curcumol)在体外对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡及周期的影响,为其临床治疗鼻咽癌提供理论依据。方法 不同浓度莪术醇作用于人鼻咽癌CNE2细胞后,用MTT法和流式细胞仪检测不同时间点鼻咽癌细胞CNE2的增殖、凋亡及周期分布。结果 莪术醇在体外明显抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05);不同浓度作用48 h后细胞凋亡率随浓度增加而增大,并使细胞周期阻滞于G2/M期。结论 莪术醇能明显抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,诱导其凋亡,能将细胞阻滞于G2/M期,具有潜在的抗肿瘤作用。

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